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1.
J Vis Exp ; (73): e50305, 2013 Mar 18.
Artigo em Inglês | MEDLINE | ID: mdl-23542875

RESUMO

The embryonic chick is a widely used model for the study of peripheral and central ganglion cell projections. In the auditory system, selective labeling of auditory axons within the VIIIth cranial nerve would enhance the study of central auditory circuit development. This approach is challenging because multiple sensory organs of the inner ear contribute to the VIIIth nerve (1). Moreover, markers that reliably distinguish auditory versus vestibular groups of axons within the avian VIIIth nerve have yet to be identified. Auditory and vestibular pathways cannot be distinguished functionally in early embryos, as sensory-evoked responses are not present before the circuits are formed. Centrally projecting VIIIth nerve axons have been traced in some studies, but auditory axon labeling was accompanied by labeling from other VIIIth nerve components (2,3). Here, we describe a method for anterograde tracing from the acoustic ganglion to selectively label auditory axons within the developing VIIIth nerve. First, after partial dissection of the anterior cephalic region of an 8-day chick embryo immersed in oxygenated artificial cerebrospinal fluid, the cochlear duct is identified by anatomical landmarks. Next, a fine pulled glass micropipette is positioned to inject a small amount of rhodamine dextran amine into the duct and adjacent deep region where the acoustic ganglion cells are located. Within thirty minutes following the injection, auditory axons are traced centrally into the hindbrain and can later be visualized following histologic preparation. This method provides a useful tool for developmental studies of peripheral to central auditory circuit formation.


Assuntos
Embrião de Galinha/anatomia & histologia , Nervo Vestibulococlear/embriologia , Animais , Axônios/química , Ducto Coclear/embriologia , Ducto Coclear/imunologia , Ducto Coclear/cirurgia , Dextranos/química , Dissecação/métodos , Gânglios/citologia , Gânglios/embriologia , Rodaminas/química , Nervo Vestibulococlear/anatomia & histologia
2.
Laryngoscope ; 108(4 Pt 1): 585-91, 1998 Apr.
Artigo em Inglês | MEDLINE | ID: mdl-9546275

RESUMO

To study the mechanisms of immune responses and immune injuries in inner ears, labyrinthitis was induced by inoculation of keyhole limpet hemocyanin (KLH) into the scala tympani of systemically sensitized guinea pigs. Inner ears were then immunostained for KLH, immunoglobulin G (IgG), albumin, connexin26 (Cx26), and sodium-potassium adenosine triphosphate (Na,K-ATPase). Inflammatory cells containing KLH were observed in the scala tympani and in the collecting venule of the spiral modiolar vein (SMV). Spiral ligament, spiral limbus, and blood vessels including the SMV were diffusely positive for IgG and albumin. Immunoreactivity for Cx26 and Na,K-ATPase was decreased compared with the normal ears in the fibrocytes of the spiral ligament. These results suggest that inflammatory cells and blood constituents could extravasate into the cochlea from blood vessels and that fibrocyte damage in the spiral ligament could cause cochlear dysfunction.


Assuntos
Antígenos/imunologia , Orelha Interna/imunologia , Labirintite/imunologia , Rampa do Tímpano/imunologia , Adjuvantes Imunológicos/análise , Albuminas/análise , Animais , Antígenos/análise , Sangue , Cóclea/imunologia , Cóclea/patologia , Doenças Cocleares/imunologia , Doenças Cocleares/patologia , Ducto Coclear/irrigação sanguínea , Ducto Coclear/imunologia , Ducto Coclear/patologia , Corantes , Conexina 26 , Conexinas/análise , Orelha Interna/irrigação sanguínea , Orelha Interna/patologia , Fibroblastos/imunologia , Fibroblastos/patologia , Tecido de Granulação/imunologia , Tecido de Granulação/patologia , Cobaias , Hemocianinas/análise , Hemocianinas/imunologia , Imunização , Imunoglobulina G/análise , Imuno-Histoquímica , Inflamação , Labirintite/patologia , Moluscos , Fagócitos/imunologia , Fagócitos/patologia , Rampa do Tímpano/irrigação sanguínea , Rampa do Tímpano/patologia , ATPase Trocadora de Sódio-Potássio/análise , Vênulas/imunologia , Vênulas/patologia
3.
Rev. otorrinolaringol. cir. cabeza cuello ; 53(1): 7-14, abr. 1993. tab
Artigo em Espanhol | LILACS | ID: lil-131694

RESUMO

Se presentan los resultados de aplicar un método de detección de anticuerpos anticocleares a 212 persona, 186 de ellas portadoras de hipoacusias atribuída a diversos cuadros clínicos y 26 normales. Se empleó la técnica de inmunofluorescencia indirecta, utilizando como antígeno material membranosoobtenido del conducto coclear humano de cadáveres frescos con menos de 6 horas de deceso. En 31 hipoacusias sensorioneurales, de las cuales 24 tenían un inicio y curso clínico que indicaban una posible etiología autoinmune y 7 que se presentaban asociadas a un cuadro sistémico de reconocida etiología autoinmune, la positividad en la detección de anticuerpos anticocleares se encontró en 17 de ellas (54.8 por ciento ). En 25 hipoacusias catalogadas como hidropesías endolinfáticas retardadas sean ipsi como contralaterales, la prueba fue positiva en 13 (52 por ciento ). En estos dos grupos los porcentajes son significativamente semejantes lo que sugiere una etipatogenia similar (p<0.01). En 47 hidropesias endolinfáticas idiopáticas o enfermedad de Meniere la prueba fue positiva en 12 (25.5 por ciento ). En 26 pacientes que presentaron una sordera súbita sensorioneural la prueba fue positiva en 8 (32 por ciento ). Otros 42 pacientes portadores de una hipoacusia sensorioneural no clasificable tuvieron una prueba positiva en 8 de ellos (19 por ciento ). La prueba fue también positiva en 2 de 8 hipoacusias consideradas congénitas y en 2 de 4 otoesclerosis. Cuatro hipoacusias consideradas como presbiacusia tuvieron la prueba negativa. Ninguno de los 26 sujetos sanos presentó la prueba positiva. Esto significa que la prueba de detección de anticuerpos anticocleares tiene una sensibilidad de 54.8 por ciento , una especificidad de 100 por ciento , un valor predictivo positivo de 100 por ciento y un valor predictivo negativo de 65 por ciento . Se concluye que no sólo la denominada enfermedad autoinmune del oído interno sería atribuíble a un fenómeno de autoinmunidad, sino que otros cuadros clínicos podrían tener una etiopatogenia similar


Assuntos
Humanos , Masculino , Feminino , Ducto Coclear/imunologia , Surdez/imunologia , Anticorpos/isolamento & purificação , Otopatias/diagnóstico , Formação de Anticorpos/fisiologia , Doenças Autoimunes/imunologia , Edema/imunologia , Perda Auditiva Neurossensorial/imunologia , Imunofluorescência
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